INMUNOHEMATOLOGIA.
PRUEBAS CRUZADAS – FASE SALINA
Aplicación de la prueba.
Estas son usadas para detectar la presencia de Anticuerpos hemoaglutinantes y hemolizantes en el suero de animales donantes y los animales receptores.
Las pruebas cruzadas se clasifican en dos categorías de acuerdo a su uso en:
A- Prueba cruzada mayor: busca determinar anticuerpos dirigidos contra los eritrocitos del donante en el suero del receptor.
B- Prueba cruzada menor: busca anticuerpos en el suero del donante que estén dirigidos contra los eritrocitos del receptor.
La ausencia de aglutinación o hemólisis en la ejecución de las pruebas cruzadas no indica que los dos animales tengan el mismo serogrupo sanguíneo; esto solamente indica que los anticuerpos pre-existentes no fueron detectados y que una reacción hemolítica aguda post-transfusión es altamente imposible. Una reacción de transfusión retardada puede sin embargo ocurrir si una importante diferencia isoantigénica está presente.
Este tipo de prueba de laboratorio permite un sondeo rápido tanto del donante como del receptor cuando se desea hacer una transfusión en animales de los que no se tiene la certeza de si han recibido o no transfusiones anteriores.
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada sangre con EDTA (tubo tapa lila) y suero (tubo tapa roja)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar.
La autoaglutinación o la hemólisis severa en las muestras de sangre del receptor (paciente) imposibilitan la aplicación de las pruebas cruzadas.
HEMOSTASIA.
DIMERO D
Aplicación de la prueba.
El dimero D es el fragmento proteolítico de la degradación del fibrinógeno, es una técnica sensible y específica para el diagnóstico de CID
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma citratado (tubo tapa azul)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar.
No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
Separar el plasma por centrifugación en un plazo de 30 minutos
Enviar al laboratorio lo más pronto posible o almacenar en refrigeración.
FIBRINÓGENO- CUANTITATIVO
Aplicación de la prueba.
El fibrinógeno es una proteína plasmática de fase aguda que incrementa al comienzo de las enfermedades inflamatorias, continúa aumentando durante varios días y se mantiene elevado hasta la resolución del proceso inflamatorio. La inflamación, la supuración y la primera etapa de la gestación (28 a 37 días en le perro) cursan con niveles séricos elevados de fibrinógeno y proteínas de fase aguda.
Las hepatopatías, las neoplasias, la cirugía mayor y la coagulación intravascular diseminada cursan con una disminución del fibrinógeno.
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma citratado.
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar
PT – TIEMPO DE PROTROMBINA
Aplicación de la prueba.
El tiempo de protrombina mide el tiempo requerido para la formación de coágulo de fibrina de plasma citratado, fresco y calcificado después de la adicción in vitro de tromboplastina tisular. El PT evalúa la vía extrínseca y común. Los factores de la vía común incluyen los X, V, II, trombina y fibrinógeno. Uno de los usos principales del PT, como prueba única, es en la detección de envenenamiento con antagonistas de la vitamina K (ej. warfarina) u otras situaciones en las cuales la síntesis hepática de factores de la coagulación dependientes de la vitamina K está deteriorada. El PT es la prueba más sensible para detectar toxicidad de tipo warfarina. El PT se emplea junto con el PTT para evaluar otros tipos de coagulopatias.
El PT es más prolongado en pacientes con deficiencias de los factores de los sistemas extrínseco y común, CID, deficiencia adquirida de vitamina K, insuficiencia biliar o insuficiencia hepática.
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma citratado (tubo tapa azul)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar
No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
Separar el plasma por centrifugación en un plazo de 30 minutos
Enviar al laboratorio lo más pronto posible o almacenar en refrigeración (4°C).
PTT – TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA
Aplicación de la prueba.
El PTT mide el tiempo requerido para la formación del coagulo de fibrina tras la adición de un activador de contacto de la superficie del sistema intrínseco y calcio. El PTT es la prueba más sensible para evaluar la vía intrínseca (factores XII, XI, IX y VIII) además de la vía común (todos los factores excepto el VII). Se emplea para detectar disminución de la actividad de uno o más factores de coagulación, como en la hemofilia, EvW, CID, deficiencia adquirida de vitamina K, envenenamiento con cumarina, insuficiencia biliar o insuficiencia hepática, también se puede utilizar en el seguimiento de la respuesta a la terapia con heparina.
Los factores deben hallarse en cantidades inferiores al 30% de los valores normales para prolongar el PTT.
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma citratado (tubo tapa azul)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar
No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
Separar el plasma por centrifugación en un plazo de 30 minutos
Enviar al laboratorio lo más pronto posible o almacenar en refrigeración (4°C)
RECUENTO DE PLAQUETAS
Aplicación de la prueba.
Los recuentos de plaquetas son útiles para clasificar la gravedad de la trombocitopenia y supervisar la evolución y la respuesta de la enfermedad al tratamiento. Se registra disminución de plaquetas en la CID, depresión de la medula ósea, anemia hemolítica autoinmune, lupus eritematoso sistémico, hemorragia grave, algunas infecciones cursan con trombocitopenia.
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma con EDTA (tubo tapa lila)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar
La obtención y el manejo de la muestra son muy importantes, una venipunción adecuada para un hemograma completo habitual no suele serlo para un recuento plaquetario exacto.
Ante la sospecha de trombocitopenia se recomienda usar dos vacutainer ya que la primera sangre que sale de la aguja contamina el recipiente con tromboplastina tisular y estimula la formación de grumos plaquetarios.
El primer tubo que contiene los líquidos titulares se deben eliminar y recolectar la muestra en un segundo vacutainer inmediatamente sin retirar el dispositivo de punción.
Mezclar muy bien el tubo con la sangre y el anticoagulante
TSMB- TIEMPO DE SANGRÍA DE LA MUCOSA BUCAL
Aplicación de la prueba.
El TSMB es una prueba de la función plaquetaria sensible y especifica y se emplea como prueba prequirúrgica para descartar defectos de la hemostasia primaria.
La técnica mide el tiempo desde la aparición de sangre hasta el cese de la hemorragia; utilizando una lanceta para hacer una incisión en la mucosa del labio. Puede usarse para diagnosticar trombocitopenia, trastornos de la coagulación, disfunción plaquetaria crónica, enfermedad de von Willebrand, que cursan con tiempo de sangría prolongado.
Condiciones de la muestra.
Limpiar y desinfectar el área de la superficie mucosa del labio superior.
Se emplea una lanceta estéril para realizar la incisión.
La sangre se absorbe con cuidado colocando un papel filtro cerca del punto de incisión, sin aplicar presión sobre la herida.
Medir el tiempo hasta el cese de la sangría.
No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
TT – TIEMPO DE TROMBINA
Aplicación de la prueba.
El tiempo de trombina mide el tiempo requerido para la formación del coágulo de fibrina en plasma citrato fresco, recalcificado después de la adición in vitro de trombina. El TT es una prueba de valoración del fibrinógeno y para detectar presencia de fibrina, plasmina o los productos de degradación de la fibrina. En animales con problemas de coagulación, un TT prolongado sugiere coagulación intravascular diseminada (CID)
Condiciones de la muestra.
Muestra recomendada plasma citratado (tubo tapa azul)
Recoja la muestra utilizando los procedimientos de laboratorio estándar
No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
Separar el plasma por centrifugación en un plazo de 30 minutos
Enviar al laboratorio lo más pronto posible o almacenar en refrigeración (4°C).